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        網(wǎng)狀纖維染色銀染實驗服務
        產(chǎn)品編號:PR0066156
        別名  
        英文名  
        網(wǎng)狀纖維染色銀染實驗服務
        提供商:          上海研謹生物
        服務名稱:        網(wǎng)狀纖維染色銀染實驗服務
        規(guī)格:            樣本
        價格:60
        收費標準/服務周期/提供結(jié)果:
        歡迎咨詢詳談,我們會根據(jù)您的方案及需求制定詳細的服務協(xié)議。
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        網(wǎng)狀纖維染色銀染實驗服務
         
        實驗技術(shù)簡介:網(wǎng)狀纖維(reticular fiber)網(wǎng)狀纖維在疏松結(jié)締組織中含量較少,纖維較細,有分支,彼此交織成網(wǎng)狀。用浸銀法可將纖維染成黑色,故又稱嗜銀纖維(argyrophilic fiber)。電鏡觀察,網(wǎng)狀纖維具有等間距的橫紋結(jié)構(gòu),其化學成分也是膠原蛋白,和膠原纖維相似。網(wǎng)狀纖維的嗜銀性是由于包在原纖維上的糖蛋白所致。
        實驗技術(shù)原理:氨銀液被組織吸咐與組織中的蛋白結(jié)合,經(jīng)甲醛還原成黑色的金屬銀沉積于組織內(nèi)及表面。用氯化金調(diào)色后,再用硫代硫酸鈉液洗去未還原的銀鹽,從而將組織內(nèi)的網(wǎng)狀纖維清晰地顯示出來。
         
        實驗操作流程:
        1、切片脫蠟至水,蒸餾水洗,
        2、用0.5%高 錳酸鉀氧化5min,
        3、自來水洗,繼用蒸餾水洗,
        4、用2%草酸漂白切片2min,
        5、自來水洗,蒸餾水洗,
        6、2%硫酸鐵鈹媒染5min,
        7、水洗,蒸餾水洗,
        8、滴入氨性銀溶液浸染3 -5min,
        9、蒸餾水洗數(shù)次,
        10、 10%甲醛液還原5-10min,
        11、水洗2min,
        12、用核固紅染色10-15min,
        13、水洗10min, 各級酒精脫水,
        14、 常規(guī)透明,中性樹膠封固。
        結(jié)果:網(wǎng)狀纖維黑色,核紅色,膠原纖維黃棕色。
         
        實驗注意事項:
        客戶提供:
        1、組織樣品:新鮮組織放入液氮或80度保存,組織不少于100mg;
        2、培養(yǎng)細胞:通過細胞計數(shù)取不少于2x106個細胞于EP管,加入0 .5ml生理鹽水或蛋白保護劑,溝后保存于冰箱(-80°C, 避免反復凍融) ;
        3、血液細胞標本:以抗凝管保存血樣或以淋巴細胞分離液分離細胞后加入05ml生理鹽水或蛋白保護劑,保存(-80°C可長期保存,避免反復凍融) ;
        4、血清或細胞培養(yǎng)液標本:離心去掉雜質(zhì)后取上清入EP管,保存(49C可保存15-20天, -80°C可長期保存,避免反復凍融) ;
        5、石蠟切片,冰凍切片以及細胞爬片,涂片等。
        6、樣本運輸:可選擇以下任何一種方式寄送標本
        組織樣本、細胞樣本以干冰運輸或加入蛋白保護劑后,加冰袋寄送;
        細胞樣本也可直接寄送培養(yǎng)瓶(密封保證不污染、培養(yǎng)液不漏出) ;
        血清或上清液直接加冰袋寄送(視快遞時效一般控制在2-3天內(nèi)),
         
        交付標準:
        1、圖片;
        2、完整項目報告(材料、試劑、儀器、方法、數(shù)據(jù)分析、實驗結(jié)果)。
        其他:
        1、所使用的玻璃儀器,須用清潔液處理。
        2、配制氨銀溶液時,氨水加入的量不能過多或不足,過多感應下降,會使液體過堿,滴染時,切片容易脫落,過少則感應上升,浸染效果不佳,不好掌握。
        3、配制氨銀液時,有可能用玻璃蒸餾水。
        4、使用的化學試劑應盡量用分析純以上。
        5、切片氧化漂白應徹底,不能使殘存的福爾馬林留于片上,否則將導致過早還原而使浸染不均勻。
        6、如果有某種原因而導致切片脫落時,應使用涂膠的載片,以增加附貼性。
        7、如有可能,氨銀溶液以新配為佳,但也可保存于4°C冰箱中達一 個月左右,這種液體易揮發(fā),用后即須蓋緊,當沉淀物出現(xiàn)時,該溶液應拋棄。
        8、應秀氯化金調(diào)色時,可將膠原纖維著染的黃棕色去除掉。
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